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本文标题:"请举例说明DNA重组技术,如何应用于人类致病病毒疫苗的开发?"

新闻来源:未知 发布时间:2011-11-23 17:46:42 本站主页地址:http://www.jiance17.com

请举例说明DNA重组技术,如何应用于人类致病病毒疫苗的开发?

 
请解释下列专有名词?

(1)    南方墨渍杂交法(Southern Blot)

(2)    DNA晶片(DNA Microarray)

(3)    晶片式全基因体定量分析技术

(Array Comparative Genomic Hybridization)

(4)    单一核苷酸多型性(Single Nucleotide Polymorphisms; SNPs)


(3) 晶片式全基因体定量分析技术
(Array Comparative Genomic Hybridization)
标准CGH Comparative Genomic Hybridization
是用于检测部分的染色体trisomy或monosomy、以及染色体部分缺失或增多的'方法。
CGH的基础是将待测组与对照组DNA与杂何的目标进行竞争性的结合,杂合的目标可以是用如同要进行FISH时,平铺于显微镜用玻片上的正常染色体,或者一组已知组成的BAC选殖株DNA,以阵列化的格式点制而成的玻片。
简单来说,就是分析特定DNA和肿瘤细胞内copy number的改变(获得/失去)

(5)    基因序列考贝数多型性(Copy Number Polymorphisms; CNPs)


二、请举例说明DNA重组技术,如何应用于人类致病病毒疫苗的开发?
DNA疫苗
利用基因工程技术将抗原的机印植入表现质体(expression plasmid),将其作为疫苗打入人或动物体后,表现直体在细胞内表现并产生抗原蛋白而达到引发免疫反应的效果。
优点:免疫效果佳、稳定、储存容易、储存时间较长
缺点:有安全性的顾虑,就是有基因突变之可能
DNA疫苗研究的疾病:流感、HIV、狂犬病、B肝、新城鸡瘟、疟疾...

次单位疫苗(subunit vaccine)
目前次单位疫苗的产品包括第三代的B肝疫苗
製备方法:
从病原俊基因体中选值此抗原蛋白质的基因,然后利用遗传工程技术,将此蛋白基因送入大肠杆菌中,大量生产抗原蛋白。接着收集、破坏大肠杆菌来进行抗原蛋白的纯化最后在製成疫苗。
优点:安全性高、智被技术容易採集
缺点:免疫效果差

减毒性活菌疫苗
目前的产品:口服沙宾、痲疹、德国麻疹、卡介苗、狂犬病
致病基因剔除法:利用基因工程技术将病原菌的治病基因(virulence factor)剔除。(遗传工程)
筛选自发性的突变病原菌→只是找出突变的病源菌(致病力降低)


三、请解释下列专有名词?

(1) 南方墨渍杂交法(Southern Blot)
我通常都念'南方墨点法"。
实用对象是DNA,DNA经过胶体电泳分开之后,将洋菜浇上的DNA转印到硝化薄膜上(此技术称Southern transfer),再以互补的DNA当作探针(probe,以标定有放射性元素或者萤光分子)进行杂交分析,利用放射性或萤光找出特定DNA片段。


(2) DNA晶片(DNA Microarray)
又称"Bio-chip、gene chip, DNA chip,"就是将生物细胞内的大分子例如:DNA、Antibody....甚至cell等(当作探针),用微面积、高密度的方法精确点制在玻璃片或者 Nylon膜...等之固体材料上,然后将sample(带有基因序列且有标记上萤光)与晶片杂交(hybridization)反应,之后就可以利用去判读正常基因与不正常基因(或许是捱化、疾病....)的表现之异同(可能过表现或者表现削弱)
DNA晶片的应用范围广泛,可应用于疾病诊断及一些专业的的研究上等等。

(3) 晶片式全基因体定量分析技术
(Array Comparative Genomic Hybridization)

(4) 单一核苷酸多型性(Single Nucleotide Polymorphisms; SNPs)
就是,在基因体上某些位置,各种的核甘酸都可能出现,发生率超过1%。
每个人的基因体DNA之30一个硷基对中,影99.9%是相同的,仅存在0.1%之差异,其中最主要就是SNPs。平均每1000歌硷基对就会出现一个SNP,固人类基因体中约有300万个SNPs。
大多数的差异只造成个体的间的差异,却不会对个体的生存造成影响,但是也有的差异会造成严重的生理异常或者疾病。
SNP可以作为疾病的预测、疾病的诊断、疾病的预防、疾病的治疗、体质判断、药品开发之依据。

(5) 基因序列考贝数多型性(Copy Number Polymorphisms; CNPs)
就是呈现人类基因体的变异

Array Comparative Genomic Hybridization
每个点都是由对应特定染色体的位置的BAC进行DOP-PCR製作。这个方法提供更好的解析度,期限制就是可供取用的BAC数量,染色体区段必须在BAC中,才会被点在为阵列上。

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