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流动双折射
由于杆状细菌的运动会引起流动双折射,因此,杆状细菌悬浮液
的混浊度比球状细菌悬浮液的混浊度更难于准确测量。这种运动是由
将细胞倾入比色杯时给予细胞的运动以及来自光束的吸收热产生的热
搅拌所引起的。这两种运动来源的结合,导致光度计缓慢地并且有些
飘忽不定地达到平衡点。维生素测定中的最大误差可能是由流动双折
射引起的误差。长杆状细菌在普通的光度计中,实际上不能准确地,
迅速地测量混浊度。这是人们宁愿选用球状细菌,或者在最坏的情况
下,要选用短杆状细菌作为测定菌的一个原因。
杆状细菌悬浮液的混浊度,可以在没有由流动双折射引起的误差
的情况下被测定。:通过测量以大约1.5~2毫升/秒的速度流经亚瑟
·赫·托马斯公司9120—N05流动槽的悬浮液的吸光度,可以做到这一
点。已经发现,其他的流动槽都不符合要求。这种流动槽装有聚乙烯
管和一根8英寸长的、19—规范的不锈钢管作为样品探测器。调节真空
度以获得适当的流动速度。常常有小气泡落在流动槽内, 因而得到
;错误的读数。利用在流动槽和真空源之间真空管道的暂时关闭产生
的水击作用,可以除去气泡。在开始流动后,管道应该关闭大约一秒
钟。一段橡皮管上加一个夹钳是控制流速的适当的装置。
光度计的校准
对细菌生理学的一些问题,并不需要知道细菌群体的绝对数量;
而是通过与细菌数量成正比的相对数字来表达必要的信息。
重要的校准是在仪器的反应与细胞的相对浓度之间建立一定关系
。校准曲线的总的形状似乎与微生物无关。曲线的形状对活舶和加热
杀死的金黄色葡萄球菌是相同的。
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