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光源
由于光源发出的光谱能量中只有很少部分
特点,荧光显微术可用紫外光激发或紫蓝光激发。
紫外光的优点在于可观察机体组织的自体荧光
(如核酸就需要用紫外光激发)。
在组织学中便于区别背景荧光和染色目标的荧光。
但紫外光的缺点较多,由于紫外光的光子能量大,
常常迅速引起标本荧光的光致碎灭(quenching),标本难于
重复观察,使摄影发出困难。而且,对绝大多数荧光色素
来说,紫外区不是它最大的吸收区,因而不能使荧光色素充分
激发。另外,对长期操作的人员来说,紫外光容易引起对眼
睛的伤害,而紫蓝光则基本上没有这些缺点。
紫蓝光对荧光的碎灭作用比较微弱。同一标本可以长期观察,
易于摄影和记录结果。并且处在大多数荧光色素的最大光谱吸收区,
容易激发起较强的荧光。在一般应用荧光色素的荧光显微术工作
中,用紫蓝光作激发光源比紫外光好。
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