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本文标题:"制备高品质的显微镜载玻片必须预先清洗"

新闻来源:未知 发布时间:2016-7-17 4:20:57 本站主页地址:http://www.jiance17.com

制备高品质的显微镜载玻片必须预先清洗

制备
    在制备巾期染色体铺片之前,高品质的显微镜载玻片必须
预先清洗:用乙醉/乙醚(100:1)液冲洗和用不起毛的布或薄
镜纸擦干。甲醉必须是新的(为铺片须购买小瓶装的和只用新
瓶)。用在进行秋水仙胺处理同步化和用KCI低渗处理之后,
从水浴中移去lOml的细胞培养物。按比例加人I.Oml新的甲
醉和乙酸(3:1)固定剂到KCI细胞悬浮液中,然后倒71轻轻
地混合这些物质。
    离心之后(200g, 8分钟),留下0.3m1,移去其余上清
液。用手指或低速振荡使管中的物质轻轻地重新悬浮。在轻轻
振荡的同时逐滴加人固定剂,接下来的3ml固定剂征5滴征5
滴地加人。最后迅速加人4m1固定剂,同时倒置混合.总数为
lOml的固定剂。在最后固定的水相中,红细胞应当溶解,证
据就是细胞的混浊液变清。在室温培养溶液20分钟,然后按
通常那样离心。
    离心之后,留下0.3m1上清液,移去其余的上清液,轻
轻振荡使沉淀物重新悬浮,加人lOml新的固定剂,同时振荡,
头Sml按每次0.5ml的量加人,然后在室温继续培养细胞10
分钟。该洗涤过程再重复两次以上。在最后一次洗涤之后,重
新悬浮细胞沉淀,放人一个离心试骨中。如果在试竹中制备的
细胞含有黑色凝块,其样品必须弃掉。白色凝块可以用巴氏吸
管吸取。

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