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本文标题:"电融合技术的原理-细胞融合技术分析显微镜"

新闻来源:未知 发布时间:2016-7-31 3:09:21 本站主页地址:http://www.jiance17.com

电融合技术的原理-细胞融合技术分析显微镜

    电融合技术的原理在于,悬于大小不同的两平行电极间伊低导
电率溶液中的细胞,在1—100MHz和100—1000V/cm交流电场中,会
向小电极移动,并极化成偶极子,而沿电场力向排列成串,此时再
加上适当强度和持续时间的高压电脉冲,即可使相邻细胞膜的接触
区产生可逆电击穿,从而触发细舱融合。
    由了电融合技术具有融合率甚高,可达50—80%,以及可在显
微镜下定向诱导细胞融合和可直接挑选杂种细胞等优点,因而正日
益引起人们的重视。目前已有商品电融合器出售。为能在某些环节
上进一步加以改进和发展,则可望具有十分诱人的应用前景。
   杂种细胞的筛选:在上述融合条件下,并非所有的细胞都能融
合。例如在以PEG作为融合剂时,大约只有十万分之一的细胞最终
能够形成会增殖的杂种细胞。再加,细胞融合本身又带有一定的随
机性,除不同亲本细胞间的融合外,还伴有各亲本细胞的自身融合
。因此,在紧随细胞融合之后,即须设法把含有两亲本细胞染色体
的杂种细胞分离或筛选出来。
   通常面临的问题,则是须从大量快速增殖的亲本细胞中分离出
少量生长缓慢的杂种细胞。最简便的办法无疑是应用选择培养基,
使亲本细胞死亡,而仅让杂种细胞存活下来。为此,已先后利用亲
本细胞的药物抗性、营养缺陷型和温度敏感性等遗传标记,建立了
多种选择系统,并已成功地用于杂种细胞的筛选。此外,在融合前
用人工标记亲本细胞,或以致死剂量的生化阻抑剂来处理亲本细胞
,也是一种较为有效的筛选办法。、

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