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本文标题:"研究标本三维结构收集同焦平面水平的图像"

新闻来源:未知 发布时间:2016-12-25 22:30:52 本站主页地址:http://www.jiance17.com

研究标本三维结构收集同焦平面水平的图像

z轴的光切间距
    为了研究标本的三维结构,要收集一系列不同焦平面水平的图
像,相邻焦平面的间距由向聚焦器发出的指令决定。确保重建图像
在z、Y及z轴上的比例正确的最简单办法就是收集的光切面在2轴上
的间距与z、y轴上的像素值相同。但是,z轴上标本进行适当取样
所需的焦平面间距应不小于z、Y轴上的像素值,原因在于纵向分辨
率比横向分辨率差。最佳的焦平面间距(依据奈奎斯抽样定理)为纵
向分辨率除以
    更小的焦平面间距会导致取样过多,光漂白的危险性随之增加
。照明强度
    照明强度逐渐提高到使荧光发射量达到饱和水平的过程中,荧
光发射量呈线性增长。照明强度刚好低于能使荧光发射量达到饱和
水平时,信号背景比与信噪比达到最佳。通过在光路中插入中密度
滤光片和/或使激光器在极限功率下工作来调节激光扫描显微镜
照明强度。一般来说,光漂白比例在可接受范围内的情况下,照明
强度越高,得到的图像越好。
    共聚焦图像的反差及信息量受光电倍增管(PMT)放大仪黑色电
平及增益的影响。为获取最大信息量,

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