---
---
---(点击查看产品报价)
本文标题："请问HA-p53所指的HA是什么缩写？"
请问HA-p53所指的HA是什么缩写？
若前方加上pcDNA 是否变为vector？
拜託了解分子生物的知识达人解答！
如果能连同实验步骤.方法与运用详加说明更佳，
谢谢！
HA是vector上提供的HA-tag
是vector上的一段序列
通常在vector的MCS(multiple cloning site)后面,有些tag也在前面...
基因接进MCS中,如果基因表现之后,
会和基因产生的protein形成fusion protein...
就是说基因产生的protein后面会多一段HA序列...
加上HA-tag的目的,
是为了在protein做一个标记...
作为日后实验时...侦测或是纯化protein时用的marker...
其他功能类似的tag还有myc,6Xhis,V5 epitope,GST,GFP,RFP,YFP,lacz,bioluminescence ...等
HA-tag是一段九个胺基酸的序列,胺基酸序列是(YPYDVPDYA)
可以用HA-tag的antibody去侦测或是纯化蛋白...
所以你的plasmid,pCDNA-HA-P53
所产生的protein是和HA-tag形成fusion protein的p53protein
接上这些tag的目的...当然是为了侦测或纯化protein用的
就像有些protein我们会construct在GFP的vector上...
产生GFP的fusion protein...
之后我们只要在萤光显微镜下观察,就能知道基因的表现情形...
或是做动物实验时,可用于追踪细胞...
或是可用于大量纯化protein...
例如接上GST或6XHIS...
GST是Glutathione S-transferase ,会和Glutathione结合...
6XHIS是6个histidine,可和Ni(镍)结合...
Glutathione或Ni接上bead后,可用于纯化这种protein...
你的p53protein 形成的HA-tag fusion protein
当你做细胞染色时,可用HA-tag antibody来侦测p53的表现情形...
或是如果要做protein-protein interaction 方面的实验,如免疫沉淀...
因为当使用p53 antibody时,antibody接上p53 protein 时,
p53 protein有可能会发生结构改变,
或是和其他protein interaction的位置被antibody挡住...
可能使protein失去和其他protein interaction的能力
所以或做一个HA-tag fusion protein...
再用HA-tag的antibody去认fusion protein的HA-tag...
这样就不会因为接上antibody发生结构改变,
或是和其他protein interaction的位置被antibody挡住的情形发生...