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本文标题:"用于酵母孢子和细菌细胞等小型细胞的显微镜型号"

新闻来源:未知 发布时间:2014-4-30 14:34:16 本站主页地址:http://www.jiance17.com

用于酵母孢子和细菌细胞等小型细胞的显微镜型号

    人们常用显微操作器来分离包括酵母在内的微生物的单细胞和
单孢子.对于酵母孢子和细菌细胞等小型细胞,可以用与子囊解剖
相同的解剖针来分离.但是,对于酵母的二倍体或多倍体等大型细
胞,即便用解剖针触着细胞并使之移动,也很难使之附着在解剖针
上。这时,一般采用微型移液管。


 一、微型移液管的制作方法
    将外径约0.8mm的细玻璃管的一端拉细,插入金属鞘固定,将
玻璃管垂直,具体步骤全部操作都在显微镜下面进行。


细胞分离操作

    操作前制备好移液管,不必再灭菌.首先,取下起保护作用的
金属鞘,装在用于显微操作的支管或L型移液管夹具上.

在这种情况下,用树脂固定插入移液管的夹具口,同时密封.在三
通口处.将其一口用橡皮管连接,橡皮管的另一端接一个约5m1的
注射器,将它做为接收器,把移液管孔向上,橡皮管用接收器台夹
固定.


    分离技术与子囊解剖相同.也在琼脂板上进行.把琼脂板从培
养皿中无菌地取出,放在大型玻璃上(最好为24 X 35mm 或 24X50
mm).用接种环沽取细胞悬液点滴在琼脂表面上,置于解剖湿室
内放置一会儿,使水分渗入琼脂内.这时如果留有大量的水份,

则很难使微型移液管接近目的细胞。似过于干燥也不好.最好是使微
型移液管顶端接触细胞时.处于可滑动状态。使移液管慢慢接近于
这种状态下的琼脂板上的细胞,这时用左手拿注射器,加压,加大
移液管内的气压,压力过高,则会吹起泡来;而压力过低,则由于
毛细管现象而吸收大量的细胞.所以.接触到了细胞时,要稍稍降
低移液管内压,使细胞滑进移液管中.由于吸进去的细胞仅仅留在
移液管的顶端部分.因此,需将移液管顶端下移.离开琼脂表面,
然后,移动琼脂板至适当的位置.使移液管上升,与琼脂表面接
触,同时提高移液管内压.细咆就由移液管口滑出、跑到琼脂板

上.重复操作.在一个琼脂板上可以分离到10-20个单细胞,分离
操作终了 ,将琼脂板从玻璃上取下.转移到培养皿中的背养培养基
平板上,在适当的温度下防治2-3天,等待菌落长出为止

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