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本文标题:"杆菌生长到高细胞密度-细菌培养显微镜"

新闻来源:未知 发布时间:2016-12-22 1:08:20 本站主页地址:http://www.jiance17.com

杆菌生长到高细胞密度-细菌培养显微镜

 大肠杆菌
    如果不需要翻译后的修饰,通常选择大肠杆菌作为初始宿主。
大肠杆菌普及性的主要原因是人们对它有深厚的知识基础。我们对
大肠杆菌生理和遗传学的理解可能要远超过其他任何生物。大肠杆
菌有非常宽广的宿主背景(即特殊突变的组合),以及种类丰富的载
体和启动子。这种庞大的知识基础极大地便利了复杂的基因操作。
背景明确的载体和启动子大大加快了合适生物催化剂的开发。
    大肠杆菌有相对较高的生长速率,也能达到很高的细胞浓度(
大于509干重/L),并具借助于特殊的载体一启动子组合而可能具
有很高的表达水平(约占总蛋白的25%~50%或更多),这导致了极
高的体积生产率。大肠杆菌也能在简单廉价的培养基上生长。所有
这些因素给大肠杆菌带来了许多经济上的优势。
    开发能使大肠杆菌生长到高细胞密度的策略是一项重要的技术
贡献。乙酸和其他代谢副产物的积累能够显著抑制生长。通过控制
葡萄糖的流加来阻止培养基中葡萄糖的大量积累可以阻止溢流代谢
和乙酸形成。如果能够在线监测或预知葡萄糖消耗速率,可以将葡
萄糖流加和其消耗速率偶联在一起进行流加控制。
    但是,大肠杆菌并不是一种绝对完美的宿主。主要问题在于大
肠杆菌通常不分泌蛋白质。当蛋白质被保留在细胞内并达到一个很
高的水平时,溶解的活性蛋白质的量通常不再增加,这是因为蛋白
质的水解作用或形成了不溶解的包含体。



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