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本文标题："用光密计量学定量影像和用磷光成像在凝胶中直接检测"
新闻来源：未知 发布时间：2017-3-10 23:38:45 本站主页地址：http://www.jiance17.com
用光密计量学定量影像和利用磷光成像在凝胶中直接检测
单元7．7介绍了免疫印迹的实验方法(也称为Western blottin
g)。在该技术中，通过单元7．1中所述电泳技术分离得到的蛋白质
被电泳转移到一个薄膜之上(“电印迹”)，该薄膜就成为聚丙烯酰
胺凝胶的一个复本，随后用带有特定蛋白抗体的探针进行检测。一
抗可通过和125I标记的二抗或蛋白质A一起孵育，自显影后显像(单
元7．8)。近年来，放射性碘标记抗体方法已逐渐被非放射性的酶
偶联抗体如碱性磷酸酶或辣根过氧化酶(单元4．4)方法所取代，通
过酶作用于底物将其转化为有色、发光或具有荧光的物质。非放射
性的方法与放射性的方法具有一样的敏感性，其更大的优势在于不
需要在使用放射性时进行特别的防护。非放射性的检测是现今肉眼
观察免疫印迹蛋白质的可行方法。非放射性方法的缺点是它们检测
的线性范围比较狭窄，同时该方法必须要求精确的蛋白质定量，可
能也是该技术存在的另一个问题。
如何利用放射性自显影的方法使电泳分离的放射性标记的蛋白
质和碘标记抗体或蛋白质A免疫印记检测到的蛋白质显像的方法。
该技术利用放射源发出的射线使光学胶卷显影以达到显像的目的。
在该技术中，可采取增强显示或使用发光化合物的方法提高敏感度
，使放射性吸收基团发光从而形成影像。这一节介绍了几种不同放
射源自显影的检测方法，以及用增强显示或使用荧光以增强信号的
方法利用光密计量学定量影像和利用磷光成像在凝胶中直接检测和
定量放射性样品的方法
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