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本文标题："常見的细胞培养问题—解决办法"

常見的细胞培养问题

1. 解冻后观察:

1-1 镜检

(Microscopic)

1-1-1
细
胞
數
少

可能引起的原因

1. 解冻后若以離心方式去除

DMSO，部分细胞未有效沈

淀，细胞數将会减少。

解决方式

1. 考虑直接将解冻后的细胞悬

浮液加入含新鲜培养基中直

接培养，细胞贴附后，第二天

再更换培养基。

1-1-2
存
活
率
不
佳

2. 有些细胞容易絮聚而沈积在
2. 细 胞 解 冻 后 pipetting 5 至 7
冷冻管底部，若吸取细胞悬浮
次，混合均匀。
液前没有充分混合均匀，则可
能只吸到细胞數较少的上清
液。

1-1-2-1

有 些 细 胞 本 身 冷 冻 后 存 活 率 不 解冻后先培养在 T25 flask。

佳或细胞數较少。

1-1-2-2

解冻后受 DMSO 毒害:

1. 细胞对 DMSO 的毒性较为敏 1. 解 冻 后 的 细 胞 必 须 立 刻 经 由

感，例如:HL-60 细胞。

2. 细胞解冻后，细胞悬浮液在冷 2. 先 将 所 有 实 验 材 料 准 备 齐
全，培养基预热好再进行解
冻管内时间拖太久。
冻。

3. 解 冻 后 的 细 胞 悬 浮 液 种 至 3. 至少加入 10ml 以上的新鲜培
养基或使 DMSO 浓度在 1 %
(seeding) 含 新 鲜 培 养 基 的

flask 内 ， 但 由 于 培 养 基 量 太

少而不足以稀释 DMSO 的毒

性。

1-1-2-3

解冻前后受温度变化之伤害:

1. 收 到 本 所 寄 出 的 细 胞 后 没 有

马 上 解 冻 培 养 或 是 暂 存 在 -80

℃冰箱的时间太久。

離心方式去除 DMSO。

以下。

1. 收 到 细 胞 后 最 好 是 尽 速 解 冻

培养或暂存于-80℃冰箱，并于

翌日转移到液氮筒内。若暂存

1