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新闻来源：未知 发布时间：2012-5-12 21:00:32　本站主页地址：http://www.jiance17.com

Affirm VPIII测试，是一种利用分子生物去氧核糖核酸探针技术(DNA probe)以侦测 检体中微量致病菌之分析方法(如图一)。 可以同时侦测出检体中三种病原菌： Gardnerella vaginalis ； Candida sp. ； Trichomonas vaginalis [7] 。 Affirm VPIII侦测原理乃使用capture probe 与color development probe，两者在遇到检体中之Target rRNA时，发生融合反应 (hybridization) [8] ，再经由连续冲洗(wash)，以除去游离的探针(free probe)。 此时，加入反 应呈色酵素，和color development probe结合，再加入受质，酵素催化受质使之反应呈色， 蓝色判定为阳性反应

操作步骤如下： 

1.将阴道拭子检体放入试管内，加入12滴lysis solution，并搅拌均匀盖子压紧。 

2.置于85℃加热器10分钟。 

3.再加入12滴buffer solution，并搅拌均匀。 

4.将4滴受质(substrate solution)加入试剂槽之第七格。 

5.把步骤3之拭子丢弃,更换成过滤头,将检体过滤,加入试剂槽之第一格凹槽。 

6.将检测卡(Probe Analysis Card)置入试剂槽之第一格，由仪器操作，33分钟后判读结果

对照其临床症状，可以发现确有细菌性阴道炎的病症；有可能是培养 结果为多重细菌丛，被其他细菌覆盖忽略 G. vaginalis的判定。 

检验Candida sp.结果有15

个检体在显微镜检查中呈阳性，但是在病原菌培养及Affirm VPIII测试皆呈现阴性的结 果，可能原因为镜检人员误判或病原菌太少。 检验 T. vaginalis结果有1个检体在显微镜检 查中呈阳性，但是在Affirm VPIII测试中呈现阴性的结果，追踪其检体处理时间，发现操 作Affirm VPIII测试为采检后20小时内需完成，但已超过其标准时间4小时 [7] ，因而有可 能产生误差。 比较三种方法结果，可以得知有其差异性的存在。 G. vaginalis在病原菌培养 的结果为47﹪，而Affirm VPIII测试中降为40.7﹪，是因为Affirm VPIII测试则必须在菌 量大于2×10 5 CFU/ml以上才会呈现阳性结果。 同样情形，Affirm VPIII测试则必须在 Candida sp.菌量大于1×10 4 CFU/ml以上， T. vaginalis菌量大于5×10 3 /ml以上才会呈现阳 性结果

利用Affirm VPIII在28个检体检测出 Candida sp .当以培养法确认时，其中有27个 检体同时培养出 Candida菌株，我们再进一步鉴定后分别为Candida albicans占62.9% (17/27)； Candida galabrata 37.1% (10/27). 最后评估的结果，我们认为虽然镜检法方便简单，但仅靠Clue cell来认定 Gardnerella则可能因菌量不足或认 定错误，造成 Gardnerella vaginalis伪阳性偏高， 而BD Affirm VPIII对于检测阴道炎 Candida感染较镜检法具有较高敏感性(81.8% vs 66.7%)及特异性(98.8% vs 92.1%)；对于 Candida sp .及 G. vaginalis 的确认亦具较 佳之阳性预测值，同时解决一般实验室无法培养 Trichomonas的问题 ，唯试剂成本 稍贵(约800元) ，但仍为 临床诊断提供一个简单、快速及准确的方法